產品介紹
基 因 型recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44 (rk-,mk+), relA1 lac [F' proAB lacIqZ?M15: Tn10 (tetr)]簡 要 說 明XL1-Blue菌株能保證高拷貝質粒穩定復制,recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩定和高純度質粒DNA的提取。hsdR17突變導致EcoK核酸內切酶系統缺失,增強了外源DNA的穩定性和提取質量。lacIqZΔM15 的存在使XL2-Blue菌株可用于藍、白斑篩選。此菌株具有四環素抗性。High5TM系列XL1-Blue感受態細胞經特殊工藝制作,經pUC19質粒檢測轉化效率>1×109cfu/μg。操 作 說 明1.XL1-Blue感受態細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻,待菌體處于冰水混合狀態時迅速插入冰中),加入目的DNA(質?;蜻B接產物)并用手撥打EP管底輕輕混勻,冰上靜置25分鐘。2.42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰上并靜置2分鐘,晃動會降低轉化效率。3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養基(2YT或LB),混勻后37℃,200rpm復蘇60分鐘。4.5000rpm離心一分鐘收菌,留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養基上。5.將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。注 意 事 項1. 感受態細胞最好在冰上融化。2.混入質粒或連接產物時應輕柔操作。3.轉化高濃度的質?;蚋咝实倪B接產物可相應減少最終用于涂板的菌量。
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