產品介紹
X–Gal是β–半乳糖苷酶(β–galactosidase)的底物,水解后呈藍色。常用于β-半乳糖苷酶的原位染色檢測以及藍白斑篩選。基于這個特點,pUC系列載體DNA(或其他帶有lacZ基因載體DNA)以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體載體DNA進行轉染時,如果在平板培養基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互補性,可以根據是否呈現白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑選出基因重組體。溶解度: 20 mg/mL DMSO [α]20D : -64 ° (C=1, DMF) 使用方法 :首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存),然后在100 ml的瓊脂培養基中,加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG(24 mg/ml)和100 μl的Amp(100 mg/ml),制作成X-Gal、IPTG、Amp平板培養基。當DNA片段插入至pUC系列載體(或其他帶有lacZ、Amp基因載體),然后轉化至lacZ缺失細胞中后,涂布上述的X–Gal、IPTG、Amp平板培養基,可根據長出菌體的藍白色,而方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)。注意事項 : ◆ 培養噬菌體時,Top agar中的添加量為:50 μl/3 ml(20mg/ml)。 ◆ 含有X-Gal的培養基4℃避光保存,須在1~2周內使用。