產品介紹
本試劑盒用于檢測細胞凋亡早期的發生,其中Annexin V為胞內蛋白膜聯蛋白家族成員,以鈣離子依賴的方式選擇性與磷脂酰絲氨酸(PS)結合。
PS 正常分布在細胞膜內側,即與細胞漿相鄰的一側。在細胞發生凋亡的早期,不同類型的細胞都會把PS外翻到細胞膜外側。用帶有FITC標記的Annexin V,即Annexin V-FITC,就可以通過流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測到 PS 外翻這一細胞凋亡的重要特征。
7-氨基放線菌素D(7-AAD)是一種非浸入性染料,可以用來檢測無活性的細胞。它不能通過正常質膜,隨著細胞凋亡、細胞死亡過程,質膜對7-AAD的通透性逐漸增加。染料一旦進入細胞,它將結合到細胞內DNA分子上,在合適波長激發光的激發下發出明亮的紅色熒光。7-AAD同PI有著相似的熒光特性,但其發射波譜較PI窄,對其他檢測通道的干擾更小,在多色熒光分析中是PI的最佳替代品,可與Annexin V-FITC/PE聯合使用。
將Annexin V-FITC與7-AAD聯合使用時,7-AAD被排除在活細胞(Annexin V-/7-AAD-)和早期凋亡細胞(Annexin V+/7-AAD-)外,而晚期凋亡細胞和壞死細胞同時被FITC和7-AAD結合染色呈現雙陽性(Annexin V+/7-AAD+)。
FITC最大吸收波長為490nm,激發波長為525nm。7-AAD可被488 nm氬離子激光激發,發射波長為647nm。